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westernmarker条带
wb原始数据一定要
带marker
吗
答:
一定。
Marker
主要是用来指示蛋白
条带
所对应的分子量大小,只有标准量精确无误了,实验结果才有说服力,因此WB原始数据必须带有
Marker条带
对照,且必须包含有阳性和阴性对照,是实验成功的必要条件之一。
如何计算
western
blot 两
条marker
中间蛋白
条带
的分子量
答:
1 在SDS-PAGE中监测蛋白的迁移;2 确认转膜效率;3 根据
marker
的
条带
估计分子量;4 确定目的蛋白位置.
western
跑出的
Marker条带
弯曲是怎么回事
答:
胶凝的不好不均匀~注胶前充分混匀~凝胶时间充分~浓缩胶分离胶pH准确~电压合适~
Western
blot实验电泳时
Marker条带
不清晰,很弥散,无法辨别有几条带...
答:
如果只是
marker
不清晰,就是markr没煮好,或者降解了。重新换一个新marker,严格按配方煮。如果所有
条带
都这样那就是胶的问题。胶的前沿跑的齐吗?速度如何?如果跑的时候就不正常那也可能是电泳缓冲液配错了。
为什么转膜后膜上没有任何
条带
连
Marker
都没有
答:
western
转膜有时候
marker
深,有时候浅是很正常的事情 因为不同批次转膜的时候,电压电流缓冲液温度等等条件不可能完全保持一致,在各种条件变化的情况下,很容易造成批次间的差异,具体表现就是有时候marker深,有时候浅(太浅就不容看见,类似消失)。
做
Western
Blot 跑电泳之后的胶上
Marker
的
条带
,比较清晰,但与模板Marke...
答:
得看你少的哪
条带
,一般来说最后一条带比较容易看不到,可能是由于你配胶的溶液放置时间长了浓度不够了,比如30%的丙烯酰胺。也可能是跑出去了或没跑完你就停了。
蛋白
marker
为什么能作为显色
条带
答:
这个
Western
Blot参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白
条带
所对应的分子量大小,只有标准量精确无误了,实验结果才有说服力,除此之外,蛋白标准还有表示转移成功或者蛋白在凝胶上的电泳程度等等的作用,所以选择正确的蛋白
Marker
也是
western
blot实验成功的必要条件之一。总体来说,蛋白分子量标准可以分成...
电泳maker
条带
依次大小都是多少啊
答:
高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的
Marker
即单色预染和多色预染。在
western
Blot过程中,分子量Marker就像个螺丝钉一样虽然是个小细节,然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个
Western
Blot参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白
条带
所对应的分子量大小。
WB常见
条带
问题最全解答
答:
1.
条带
去哪儿了?如果胶片上空无一物,无条带的困扰你可能遇到了:抗体问题:一抗和二抗不匹配(★★★)?解决方案:确保一抗与目的蛋白物种相符,选择合适的一抗/二抗稀释比例,确认抗体活性。实验操作:转膜失败或抗体加错(★★)?建议:优化转膜条件,预染
marker
检查,确认操作无误。其他原因(...
做
western
,彩色的
marker
跑的胶上了,考马斯亮蓝没染出样品的蛋白
条带
...
答:
如果
marker
跑在胶上的话说明胶是没问题的,要么是你样品蛋白含量太低,可以将样品浓缩一下,也可以加大上样量;或者可能你配的胶的浓度有问题,这样样品可能跑不开,建议根据蛋白的分子量按照分子克隆选用分离胶浓度。
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