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ncbi提交pcr序列
qpcR技术是什么原理?
答:
使用如primer premier 6这样的专业软件,导入CDS
序列
,进行搜索和设计。软件会分析并推荐合适的引物,展示高级结构信息,帮助我们挑选出最佳组合。最后,通过
NCBI
的primer-BLAST功能进行特异性检验,确保新设计的引物不会在非目标区域造成干扰。总的来说,qPCR引物设计是一个精细且科学的过程,它要求精确的序列...
PCR
不能扩增出目的条带,用的是文献中提供的引物
答:
建议:1、用引物
在ncbi
里去查,看看是否完全匹配,国外文献尚有错误,如果是国内的...;2、不是提高退火温度,而是降低,看看是否有非特异性的产物;3、有条件的话,建议找一个阳性对照,质粒最方便。如果没有这个基因的,可以找一个看家基因的,再合成一对引物,做阳性对照。检查整个体系中是否有问题...
ITS分子鉴定怎么
在ncbi
中
答:
6、
PCR
扩增:(细菌的通用引物为27F和1492R)将提取得到的DNA进行PCR扩增,电泳检测扩增得到的16S rDNA(如果菌类分明,条带清晰,PCR原液可直接送去测序,双向测通,得到测序
序列
后到
NCBI
的BLAST页面比对,得出鉴定结果)7、酶切带型分型确定操作单元:将扩增产物用HhaI和HaeIII两种限制性内切酶进行酶切...
实时定量
PCR
引物设计
答:
1,
PCR
引物是利用碱基互补原则,通过找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA
序列
。2,首先要找到你用来设计引物的目的基因全序列,一般
NCBI
、Genebank上都能找得到。3,引物的长度一般为15-30 bp,常用的是18-27 bp,但不应大于38,因为过长会导 致其延伸温度大于74℃,不适于Taq DNA聚合...
想做
pcr
,但不会设计IL-8的引物,请问具体应该怎么操作啊?
答:
去
NCBI上
看看有没有人研究过 白细胞介素8咯~~有的话 应该就有已经测出的基因
序列
~~。。你再blast下得到其他动物的 白细胞介素序列~~比对下下~~找保守区~~貌似就可以了
有谁做过细菌的
PCR
实验吗
答:
6、
PCR
扩增:(细菌的通用引物为27F和1492R)将提取得到的DNA进行PCR扩增,电泳检测扩增得到的16S rDNA(如果菌类分明,条带清晰,PCR原液可直接送去测序,双向测通,得到测序
序列
后到
NCBI
的BLAST页面比对,得出鉴定结果)7、酶切带型分型确定操作单元:将扩增产物用HhaI和HaeIII两种限制性内切酶进行酶切...
测序:中间碱基有缺失
答:
1. 有突变,这很常见,再做一次确认。如果确实是的,把结果投GenBank。2.
PCR
出错了。-重做PCR(比较少见)3. 测序出错。建议先做克隆,再测序。这样就可以多挑几个克隆去测序,万一有几个出错,还有其他后备。建议一次送检至少4个
PCR
引物如何设计?
答:
ACCCC或ATATATAT;引物内部或者两条引物之间避免有5个碱基以上的互补
序列
;两条引物的 3’端避免有3个碱基以上的互补序列。6. 序列特异性:引物设计完毕请使用
NCBI
BLAST功能检索引物特异性,以避免非特异性扩增产生。注意:
PCR
的产量通常取决于PCR引物的3’端,引物间形成二聚体会降低扩增效率。
如何设计
pcr
引物
答:
可以使用oligo 6 或者primer5 等软件设计。用这些软件选择引物,主要就是看引物的稳定性,形成二聚体的可能性,退火温度等等参数。如果你的
序列
同源性不高,GC含量也还可以的话,可以使用一些经验性原则。引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。
在NCBI上
...
如何设计
pcr
引物
答:
可以使用oligo6或者primer5等软件设计。用这些软件选择引物,主要就是看引物的稳定性,形成二聚体的可能性,退火温度等等参数。如果你的
序列
同源性不高,GC含量也还可以的话,可以使用一些经验性原则。引物最好在模板cDNA的保守区内设计。DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。
在NCBI上
搜索不...
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