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ncbi提交pcr序列
GenBank上找ITS
序列
答:
你可以现在网上找到你想要的动植物细菌的Genbank登录号,然后根据登录号上
NCBI
—>Genbank—>输入登录号,根据上面说的裁剪出ITS区域
序列
即可~~~
ncbi
中的est和基因组什么关系
答:
从est到基因组还有很长的路要走 打个比方,如果完整基因组是一张拼图,那EST就是散落一地的拼图碎片
验证结构基因全长,判断是否是断裂基因
答:
1 从基因A的3’端86个核苷酸
序列
和5’端54个核苷酸序列分别设计引物 2 提取酵母DNA,以该引物
PCR
扩增,克隆测序,就知道基因A有多大;3 提取酵母RNA,反转录成cDNA,已上述引物基因扩增,看扩出的cDNA是否比基因组DNA带小,如过是这样的话,说明有内含子,为断裂基因 ...
已知部分基因
序列
,如何获得全长基因?
答:
2.1连接介导
PCR
连接介导聚合酶链反应是以连接反应为基础的单侧PCR技术,首先通过基因组DNA酶切,在酶切后的DNA片段的一端连接上一个公共连接子,而后用这个连接子为引物与另一个基因特异引物进行扩增,得到了包含连接子在内的基因
序列
。连接介导PCR又分为连接载体的PCR、连接单链接头的PCR和连接双链接头PCR。此方法...
请问在
PCR
实验中,如果不知道模板DNA的核酸
序列
的情况下如何设计PCR引物...
答:
一般来说,RT-
PCR
的时候很多情况下会不知道模板DNA的
序列
,可以在Genbank中寻找和你要扩增的物种的亲缘关系较近的物种的同源基因,多找几种,用DNAMAN或其他软件可以比对它们的序列,这样可以得出这种基因在进化过程中的保守序列,根据这个保守序列设计引物来PCR,扩增出来的机率就大多了。
PCR
中Tm值的疑问
答:
会有变化,TM值由碱基个数、GC含量决定,具体算法是有公式的,你也可以用软件预测,甚至可以
在NCBI
primer BLAST中预测。
如何设计
pcr
引物
答:
可以使用oligo6或者primer5等软件设计。用这些软件选择引物,主要就是看引物的稳定性,形成二聚体的可能性,退火温度等等参数。如果你的
序列
同源性不高,GC含量也还可以的话,可以使用一些经验性原则。引物最好在模板cDNA的保守区内设计。DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。
在NCBI上
搜索不...
pcr
反应正确过程
答:
引物是决定
PCR
反应成败的关键,要保证扩增的准确、高效,引物的设计要遵循如下原则:1. 引物的设计在 cDNA 的保守区域,
在 NCBI 上
搜索不同物种的同一基因,通过
序列
分析的软件,得到不同基因相同的序列就是该基因的保守区 2. 引物的长度:15-28bp,长度大于 38bp,会使退火温度升高,不利于普通 ...
注射用水微生物超标要做菌种鉴定吗
答:
注射用水微生物超标要做菌种鉴定 传统方法细菌做革兰氏染色 运动性试验 各种代谢 然后查伯杰氏细菌手册;用分子做的话提总DNA,
pcr
扩增16srDNA全长片段,上
NCBI
数据库比对,选择近缘
序列
构建系统发育树鉴定。真菌的话主要根据形态,特别是有性型生殖形态鉴定;分子的话一般扩增ITS区域,比对,建树鉴定。首...
血管生成素-1的分子量是70KD,是否可以做
PCR
技术?
答:
氨基酸平均为0.12个kda,那么70kda就是583.3个氨基酸,那么它gene的cDNA也就是1750bp左右,做
PCR
是没有问题的。当然这只是一个粗略的数值,具体你最好还是去
NCBI上
查一下它的具体
序列
。PCR根据所用的酶不同,可做的片段长度也不同。好的pfu酶PCR 10k bp也没什么问题(如果全是coding区,那么蛋白...
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