55问答网
所有问题
当前搜索:
17kd的蛋白用多少的胶
请教一个配制western blot胶溶液浓度的问题
答:
分离胶要用12或15%的能分清你的17KD左右的目的蛋白
。你的浓缩胶就用5%的Acrylamide就可以了。
1.5mm的胶17kd
转膜转多久
答:
1.5mm的胶
17kd转膜转大概需要1个小时 通常来说,
17kDa的蛋白还是推荐用0.2的膜
,我们没有试过用0.45的膜来转小于20的蛋白,很容易跑出去。转膜的话,17kDa的蛋白我们也是100V,60分钟一张膜,完全没问题。
关于小分子
蛋白的
Western-blot问题,实验时
的胶
浓度,电压,转膜条件等等...
答:
1。当然是
胶
的浓度。9kda的话要适当增大,15-20%应该差不多吧。如果实在不行还能考虑用gradient gel。2。二是转膜缓冲液,内要含20%甲醇,新鲜配制,反复
使用的
话注意甲醇会蒸发掉。如果连续使用的话两三次应该还可以。甲醇一是能够洗掉跑胶时泡透了的SDS(SDS使
蛋白
带负电,方便移动),二是帮助蛋...
1.5mm的胶17kd
转膜转多久
答:
1个小时。转膜是把DNA从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物,是尼龙膜上固定,是进行各种后续研究RFLP分析,阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究的前提。实验目的:掌握Southernblotting的原理及操作步骤实验原理。
western 转膜
蛋白
总是转不上PVDF膜? 有时候还出现花膜
答:
方向是
胶
负膜正。转膜过程在4度冰箱中或置入冰水浴中进行。四、时间和电压或电流依照分子量大小:分子量越大,时间越长,电压或越大。转移时间一般为1.5 小时,( 1mA-2mA/cm2,10% gel),可根据分子量大小调整转移时间和电流大小。本人觉得
17KD的蛋白
可以试试恒压90V40min。仅供参考。
westernNC膜湿转
17kd的蛋白
答:
湿转可以试试PVDF膜 300mA,60分钟 另外,如果说是17kd对应的marker很清楚,
17kd的蛋白
不清楚的话,可以先做一下SDS-PAGE的考马斯亮蓝染色,看看你的目的条带在PAGE上是否很清楚。之后再去摸索转膜条件
20
KD的蛋白
可以过5KD的膜包吗
答:
您好!应该是可以的。一般膜包孔径的选择在目的
蛋白
分子量的1/3以下就OK,5000的膜包我做过
17
、8
Kd的
。百度教育团队【海纳百川团】为您解答。 感谢您的采纳,O(∩_∩)O 如有疑问,欢迎追问。
western blot 内参 actin 是43还是45 kda
答:
a、胞浆和全细胞
蛋白
:β-actin(43KD)、GAPDH(37KD)、Tubulin(55KD)等;b、胞核蛋白:PCNA(29KD)、Histone H3(
17KD
)等;c、核膜蛋白:Lamin B(66KD)等;d、胞膜蛋白:Na+/K+-ATPase(120KD)等;e、线粒体蛋白:COX IV(17KD)、VDAC1(30KD)等。4)实际的实验环境 有些...
我要检测
的蛋白
是100
KD
,配置了8%的分离胶,该用多大的电压来跑分离...
答:
配
胶
的protocol和咱们实验室差别不大,各人可能根据习惯对一些数据稍作调整都关系不大。上样量:3μg-15μg,根据
蛋白
峰值的不同进行调整。200V电压跑45min左右 3. 转膜(半干转)1) 将胶小心从板上拿下来,置于transfer buffer 中(1×transfer buffer中加入20%甲醇)洗掉running buffer,15min。
计算目的
蛋白
是多大,怎么算,还有什么标签的,那个要另外加吗
答:
我认为你的目的
蛋白的
分子量很可能是380/3*0.11+3=
17kD
左右。式子中的3kD是pet28a载体上的MCS的大小,如果你自己没有加启动子和终止码,那么MCS就默认为是全部表达。另一个问题是,pet-28a上有两个6*His tag,它们的带电性严重影响了
蛋白质
在SDS-PAGE上的表观分子量。所以你跑胶的时候可能看到...
1
2
3
4
涓嬩竴椤
其他人还搜
36kd的的蛋白有多少的胶
80kDa蛋白WB多少的胶
40kd蛋白多大分离胶
17kDa蛋白转膜条件
大蛋白用多少的胶
跑小蛋白胶用15的
10的胶跑什么蛋白
420KDa蛋白怎么制胶
120kda用多少浓度胶