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限制性内切酶黏性末端
限制性内切酶
限制酶产生的
末端
答:
限制
酶在DNA分子上执行特定的切割任务,根据识别的序列和切割位置,可以产生不同类型的末端。一种常见的末端类型是匹配粘端(cohesive end),亦即
粘性末端
。当限制酶识别的序列呈现回文对称结构,如 EcoRⅠ 的识别位点 NNG↓AATTCNN,它在对称轴两侧切割,会形成5'和3'突出的粘性末端,例如5'突出的EcoR...
黏性末端
是指哪一段
答:
相同的
粘性末端
是指:同种
限制性内切酶
切出来的碱基。DNA粘结酶连接的是粘性末端的磷酸二酯键。质粒
的黏性末端
与目的基因的dna,片段的黏性末端是通过dna连接酶连接的。通过碱基互补配对连接氢键。
什么是基因片段的
粘性末端
答:
当一种
限制性内切酶
在一个特异性的碱基序列处切断DNA时,就可在切口处留下几个未配对的核苷酸片断,即5’突出。这些片断可以通过重叠的5‘
末端
形成的氢键相连,或者通过分子内反应环化。因此称这些片断具有
粘性
,叫做粘性末端。
某种
限制性内切酶
作用于DNA后,产生的末端必定是
黏性末端
吗?
答:
限制
酶产生的末端 1.限制酶产生匹配粘端(matched ends)识别位点为回文对称结构的序列经限制酶切割后,产生的末端为匹配粘端,亦即
黏性末端
(cohesive end),这样形成的两个末端是相同的,也是互补的。若在对称轴 5' 侧切割底物, DNA 双链交错断开产生 5' 突出
粘性末端
,如 EcoRⅠ ;若在 3'-...
粘性末端
与平末端的形成原因
答:
限制性内切酶
对DNA的切割有两种方式,即平切和交错切。平切就是限制性内切酶在DNA双链的相同位置切割DNA分子,就产生平
末端
;交错切就是限制性内切酶在DNA双链的不同位置切割DNA,产生的DNA片段的末端不是平齐的,就产生
粘性
末端。
限制性内切酶
可以连接DNA的
末端
吗?
答:
T4DNA连接酶也能催化
限制性内切酶
切割产生DNA平末端的连接。如果目的序列和载体上没有相同的限制性内切酶位点可供利用,用不同的限制性内切酶切割后的
粘性末端
不能互补结合。则可用适当的酶将DNA突出的末端削平或补齐成平末端,再用T4DNA连接酶连接,但平末端连接要比粘性末端连接的效率低得多。在分子生物...
关于
限制性内切酶
的问题
答:
粘性末端
:当一种
限制性内切酶
在一个特异性的碱基序列处切断DNA时,就可在切口处留下几个未配对的核苷酸片断,即5’突出。这些片断可以通过重叠的5‘末端形成的氢键相连,或者通过分子内反应环化。因此称这些片断具有粘性,叫做粘性末端。记住A-T G-C 所以切完后的粘性末端只要满足这个序列相对应就能...
不同
限制性内切酶
处理的dna片段之间可以进行连接吗?为什么
答:
可以。不同
限制性内切酶
处理的DNA片段可以进行连接,这是因为限制性内切酶在DNA双链的骨架上特异性地切割,产生具有
粘性末端
的DNA片段,这些片段可以通过配对互补的粘性末端进行连接。不同限制性内切酶切割的DNA片段可能会产生不同的粘性末端,但是只要这些粘性末端是互补的,就可以通过连接酶将它们连接在一起...
基因工程中的
粘性末端
法是什么意思?
答:
1、平末端法,有些核酸内切酶切出的DNA分子是平末端,对DNA分子的单链末端亦可用核酸酶S1或DNA聚合酶Ⅰ来修平或补齐,然后用T4 DNA连接酶将不同片段连接起来。该法形成重组DNA分子的效率低,只及
粘性末端
法的1%。2、人工接头法,1976年发展起来的。首先用化学法合成具有某种
限制性内切酶
识别位点的序列...
DNA
限制性内切酶
酶切DNA限制性内切酶酶切原理
答:
如EcoRⅠ会形成两个互补的
粘性末端
,示例如下:5'…G↓AATTC…3' 分割后变成:5'… G AATTC…3'3'…CTTAA↑G …5' 分割后变成:3'… CTTAA G…5'这就是DNA
限制性内切酶
的工作原理和不同类型的特性。它们在分子生物学实验中扮演了至关重要的角色,尤其是在基因操作和克隆技术中。
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