55问答网
所有问题
当前搜索:
限制性内切酶酶切体系
配置
酶切体系
时,为什么
限制性内切酶
的用量不超过整个体系的1/10?
答:
1、
限制性内切酶
作为酶,其本身也具有催化效应。如果使用过多的限制性内切酶,则可能会导致过度消耗底物,缩短反应时间,同时也可能使反应比例变得不合适。2、过多的限制性内切酶可能会破坏底物DNA分子的完整性,对DNA分子的
酶切
及下游操作会产生影响。此外,内切酶的过度活化可能导致在非目标位置上也发生切割...
DNA
限制性内切酶酶切
DNA限制性内切酶酶切原理
答:
限制性内切酶
是一种特殊的酶,它具有独特的功能,能识别并切割DNA中的特定序列。这种酶主要分为三个类别:首先,I类和III类酶具有双重功能,它们既能结合DNA的
限制酶
识别序列,又能在ATP存在下进行切割和修饰。I类酶随机地在识别位点附近进行切割,而III类酶则在识别位点上直接进行切割,切割后会从DNA...
DNA
限制性内切酶酶切
的DNA限制性内切酶酶切原理
答:
Ⅱ类由两种酶组成: 一种为限制性内切核酸酶(
限制酶
),它切割某一特异的核苷酸序列; 另一种为独立的甲基化酶,它修饰同一识别序列。Ⅱ类中的
限制性内切酶
在分子克隆中得到了广泛应用,它们是重组DNA的基础。绝大多数Ⅱ类限制酶识别长度为4至6个核苷酸的回文对称特异核苷酸序列(如EcoRⅠ识别六个核苷...
酶切
技术
限制性内切酶
答:
酶切
技术,特别是涉及
限制性内切酶
的作用机制,是分子生物学中的关键工具。限制性内切酶是一类特殊的酶,它们能够识别并特异性地切割DNA分子中的特定序列。这类酶主要分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类,它们在切割和修饰DNA过程中可能依赖ATP。Ⅰ类酶随机切割附近DNA,Ⅲ类则在识别位点上切割并分离。而Ⅱ类由
限制酶
...
限制性内切酶酶切
注意事项
答:
限制性
酶切割DNA底物的操作过程中,会出现一些问题,产生的原因主要为酶解
体系
中各要素处于非最佳状态,包括DNA的纯度和特性,反应缓冲液、反应体积、反应时间及温度等。
酶切
反应的注意点:1 20ul体系是最佳体系 2 20ul体系最多切2ug的DNA 3 甘油的量最好是低于体系的5%,最大不超过10 4 酶...
在XhoⅠ和XbaⅠ
限制性内切酶
双
酶切体系
中,反应体系是什么?或者这两种酶...
答:
反应
体系
应该指的是,两种酶同时使用时,应该用的buffer系统,且每一种酶的用量,DNA的用量,以及保证酶量不超过总反应体积的1/10,即20ul体系中,两个酶的总量不能超过2ul。你可以在
内切酶
公司网站上查到推荐的反应体系:从图上看,这两个酶在不能再另一个酶的推荐buffer中使用,只能用2X Tango ...
限制性
核酸
内切酶
切割的原理和方法
答:
限制性内切酶
的酶解反应最适条件各不相同,各种酶有其相应的
酶切
缓冲液和最适反应温度(大多数为37℃)。对质粒DNA酶切反应而言,限制性内切酶用量可按标准
体系
1μg DNA加1单位酶,消化1-2小时。但要完全酶解则必须增加酶的用量,一般增加2-3倍,甚至更多,反应时间也要适当延长。希望能帮到你O(∩...
限制性内切酶
的
酶切
实验原理是什么?
答:
II型
限制性内切酶
只需要二价镁离子的激活,酶在其识别序列内切割双链DNA,产生的各种DNA片段具有相同的末端结构,而且大多数的II型酶可提供粘性未端,有利于片段再连接,大部分II型酶所识别的序列具有反向对称的结构,或称之回文结构。生物帮上面有详细内容,加滤芯枪头(有菌) http://product.bio1000...
限制性内切酶
是什么?
答:
限制性核酸内切酶(restriction endonuclease):识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶. [别名] Endodeoxyribonuclease [酶反应]
限制性内切酶
能分裂DNA分子在一限定数目的专一部位上.它能识别外源DNA并将其降解. [单位定义] 在指明pH与37℃,在0.05mL反应混合物中,1小时消化1μg的λDNA的酶量为1单位. [性状...
酶切体系
中各物质neb 酶 缓冲液 buffer的作用?
答:
1. NEB 酶为
限制性内切酶
,对目的片段特异性序列进行识别与
酶切
;2. Buffer的作用是维持反应
体系
的酸碱度的稳定。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
其他人还搜
酶切结果图条带分析
双酶切电泳图详细分析
thermo酶切反应体系说明书
酶切图谱分析
限制性内切酶体系怎么配
限制性内切酶怎么切
酶切切开的胶图
限制酶切割位点怎么判断
酶切体系