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质谱检测蛋白质步骤详细
蛋白质质谱
分析
具体
流程
答:
胰蛋白酶溶液在4℃放置45—60min使胶粒再水化,加入1O一2o 碳酸氢铵溶液覆盖胶粒
,37cI=保温1小时后,放置过夜,所得溶液供质谱分析用。3.2 电洗脱后在溶液中酶解 电洗脱是电泳后从凝胶上回收蛋白质的经典方法。通常蛋白质量多于0.O01 mmol。将含SDS的凝胶与MALDI TOF MS分析结合,可分析亚mmol的蛋白质。Schuh...
质谱
仪是怎么
测蛋白质
序列的,过程是什么??
答:
基本过程是将蛋白质被打成单电荷片段,通过电磁偏转得到一系列长度不等的片段
,由于可测得质量,将片段排序,就可知道某个位点的氨基酸的质量,进而得知氨基酸的种类,重复此过程,可得知所有氨基酸的种类,进而得知蛋白质的序列,一般都是以及序列的信息,毕竟蛋白质测序之前要经过预处理。
国家标准
检测蛋白质
含量测定方法
答:
国家标准检测蛋白质含量的方法叫做凯氏定氮法
,食物中的蛋白质在催化加热条件下分解,导致氨和硫酸结合产生硫酸铵。 碱蒸馏采用无硫,硼酸吸收,用硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定,根据酸耗计算氮含量,再乘以转化系数,即蛋白质含量。具体操作步骤如下:1.样品处理 精确称量0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体...
质谱
搜库后如何找到需要
蛋白质
的物质?
答:
在质谱搜库之后,可以通过以下几个步骤来确定需要蛋白质的物质:
1、确认鉴定出来的蛋白质名称和序列:根据质谱数据的分析结果
,可以获取到序列覆盖率、肽段数目、质量误差等参数,以及质谱匹配得分。进一步将这些鉴定出来的蛋白质名称和序列与数据库中的注释信息进行比对,确认蛋白质的基本信息。2、确认蛋白质...
2019-11-12听课笔记之
蛋白质谱
的原理及使用(二)
答:
如果我们把质荷比都算错了,我们是很难鉴定到正确的
蛋白
的。 下面这个图也能很直观地告诉我们
质谱检测
高分辨率的优势。 比如说,我们用17,500的分辨率来对一个化合物进行扫描,会发现在质荷比在280.09的这个位置,有一个非常胖的质谱峰(第一张谱图红色圆圈标记),我们可能会认为这是一个化合物,于是就开始对这个...
如何判定
蛋白质
的
质谱
鉴定结果的差异
答:
1 单个
蛋白
鉴定1. 用于鉴定纯化的单个蛋白的溶液或粉末,或经过SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis)的单个条带或二维电泳的单个点。2. 蛋白酶解成多肽。3. 液相分离多肽,离子化的多肽进入
质谱
,母离子
检测
,母离子裂解成一系列子离子,子离子检测。4. 数据库检索。5. ...
3.
蛋白质谱
的原理及使用(1)
答:
第一张是正丁烷的谱图,横轴质荷比的取值范围是从10-60。另一张是代谢物
质谱
图,横轴质荷比是100-400。那些小柱子就是信号峰了。 接下来,我们要聊的问题就是:质谱仪是如何获得这些质谱图? 前面说了,质谱只能
检测
离子,所以要得到质谱图,首先我们要获得离子。离子分为两类:正离子和负离子,那么对应的,它们带正...
蛋白质
组的技术原理
答:
Chong 等使用HPLC/
质谱
比较分析恶性肿瘤前和癌症两种
蛋白质
差异表达。利用HPLC 分离蛋白质,并用MALDI-TOF-MS鉴定收集的组分,从而在两种细胞中的差异表达中对蛋白质进行定量分析。多维液相色谱作为一种新型分离技术,不存在相对分子质量和等电点的限制,通过不同模式的组合,消除了二维凝胶电泳的歧视效应,...
蛋白质
组学测序技术是什么方法?
答:
分析
步骤
:样品准备:包括
蛋白质
的提取、纯化和量化。蛋白质分离:常用的方法有二维凝胶电泳(2-DE)和液相色谱(LC)。蛋白质鉴定:主要通过
质谱
(MS)技术实现。数据分析:使用生物信息学工具和数据库比对,进行蛋白质鉴定、定量和功能注释。蛋白质组学测序技术是一种综合性的技术手段,通过质谱法、蛋白...
双向电泳
蛋白质质谱
鉴定
答:
你需要去问问帮你做实验的那边对样品的要求。有的地方要求是样品都处理好送过去,有的地方为了保证样品处理的质量,防止设备受损,会要求你把点从胶上扣下来,直接送过去,其他的 酶解 什么的后续处理都由他们来做。如果你们完全没有经验,最好是找人帮你做。这样的话成功几率比较大。
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