55问答网
所有问题
当前搜索:
质粒转化进原生质体
基因工程中,目的基因表达载体为什么导入
原生质体
就可以表达?
答:
质粒进入原生质体
后,会有一些进入细胞核。其机制目前还不十分清楚,可能与特定的序列被识别有关。进入细胞核的质粒就可以转录,之后mRNA就可以运出核进行翻译。质粒上一般都是带有强启动子,比如CMV。可以保证少量质粒就可以多次转录,最终生成足量蛋白质。
构巢曲霉
原生质体
的制备和
转化
答:
通过Trapping buffer逐步分离
原生质体
,确保其完整性。最后,将原生质体溶于STC buffer中,为后续操作做好准备。
转化
过程:将
质粒
与原生质体进行精准混合,轻轻振荡,低温固化。加入PEG溶液,诱导质粒与原生质体融合,形成重组细胞。将融合细胞转移到SMM平板上,进行后续筛选和培养。通过PCR验证转化成功,挑选出具...
什么状态的菌丝适合制备
原生质体
答:
在PEG和CaCl2存在条件下,以潮霉素B为选择性标记,
质粒
pBC-Hygro
转化原生质体
,每微克DNA可获得4~5个转化予。
PEG介导的
原生质体转化
答:
一般来说,原生质体储存越久,转化效果越差(Penttila et al.,1987b),所以原生质体需要现用现制备。此外,原生质体常常不止一个细胞核,这需要做长时间净化处理以得到同核体。 PEG介导的
原生质体转化
法是通过PEG的介导作用将遗传因子转入受体细胞原生质体中的一种方法,原生质体的制备与再生是转化的关键,此外CaCl2也是不...
基因工程中的
质粒
是怎样进出细胞的
答:
人为导入的,一般采用高pH、钙离子诱导法,PEP诱导法,电刺激,
原生质体转化
法,
质粒
转染和病毒转染有什么本质上的区别
答:
两者在本质上并没有区别。无论是
质粒
转染,还是病毒转染,均是真核细胞主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越...
切开的
质粒
能
转化进入
感受态细菌吗
答:
首先,切开的
质粒
是完全可能
进入
感受态细菌的,事实上所有的小分子态DNA,RNA都有可能进入任何细胞,但是你说能否
转化
又是另一回事了,如果你的质粒断在启动子了,那么就不能进行转化了,而且断的质粒很可能目的基因也断了,第三:断的质粒很不稳定,暴露的末端易遭受破坏。综上:也许切开的质粒确实能够...
「
原生质体
」是一种什么样的物质,如何制备?
答:
作为一种瞬时表达系统,
原生质体
不仅易于制备,还能够高效吸收外源物质,如细胞器、病毒、
质粒
和DNA,为科学家提供了研究细胞信号转导、离子转运、细胞壁合成等生物学过程的宝贵平台(ideal for transient gene expression and exploring cellular processes)。近年来,原生质体技术在分子机制、植物生理生化和...
根癌农杆菌Ti
质粒
介导的植物基因
转化
有哪些方法?
答:
(2)
原生质体
共培养转化法:原生质体共培养转化法是以原生质体作为受体细胞,将根癌农杆菌与原生质体作短暂的共培养,然后洗涤除去残留的根癌农杆菌后,置于含抗生素的选择培养基上筛选出转化细胞,进而再生成植株。与叶盘转化法相比,此法得到的
转化体
不含嵌合体,一次可以处理多个细胞,得到相对较多的...
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
其他人还搜
原生质体转化原理
原生质体转化
拟南芥原生质体转化
原生质体转化 失败
原生质体转化的目的
转化原生质体为什么要热
原生质体转化注意事项
原生质体转化方法不大适用于
原生质体转化试剂盒