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盐析法沉淀蛋白质的步骤
如何判断
蛋白质
在酸性溶液中产生
沉淀
?
答:
(1)可逆沉淀:在温和条件下,通过改变溶液的pH或盐浓度等,使蛋白质从胶体溶液中沉淀出来
。在沉淀过程中,蛋白质的结构和性质都没有发生显著变化,在适当的条件下,蛋白质可以重新溶解形成溶液,所以这种沉淀又称为非变性沉淀。可逆沉淀是分离纯化蛋白质的基本方法,如等电点沉淀法、盐析法(saltingout)等,...
如何用饱和nacl对乳清
蛋白
进行
沉淀
答:
您好,该实验叫做蛋白质的盐析。
方法:向在盛有鸡蛋清溶液的试管中,缓慢地加入饱和NaCl溶液,可以观察出乳白色的沉 淀
。然后把少量带有沉淀的液体加入盛有蒸馏水的试管里,可以观察到沉淀溶解。向蛋白质溶液中加入某些浓的无机盐溶液后,可以使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用 叫做盐析。这样析出的...
对未知
蛋白
进行
盐析
沉时,需要先制作盐析曲线,如何做实验
答:
搅拌1小时。3,10000g离心20min。4
,去除上清,用等体积相同浓度的盐溶液(如不能溶解沉淀也不会造成进一步沉淀的溶液)洗涤重悬沉淀两次。再次离心。5,使用少量体积后面步骤所需的低盐溶液溶解沉淀。对分离目的蛋白的盐析,最好采用分段盐析.x0d由于不同的蛋白质其溶解度与等电点不同,x0d沉淀时所需...
盐析法的
操作一般在乙醇溶液中进行
答:
洗涤:将透析后的上清液和沉淀物分别用适量的水洗涤,以去除其中的杂质和未结合的硫酸铵分子
。干燥:将洗涤后的上清液和沉淀物分别进行干燥,得到纯化的蛋白质样品。需要注意的是,盐析法的操作过程中需要注意以下几点:加入硫酸铵溶液的速度要缓慢,以免蛋白质变性。离心分离时要控制好离心速度和时间,以使...
蛋白质
分段
盐析
原理及实验
步骤
有哪些?
答:
对分离目的蛋白的盐析,最好采用分段盐析
。由于不同的蛋白质其溶解度与等电点不同,沉淀时所需的pH值与离子强度也不相同,改变盐的浓度与溶液的pH值,可将混合液中的蛋白质分批盐析分开,这种分离蛋白质的方法称为分段盐析法(fractional saltingout)。如半饱和硫酸铵可沉淀血浆球蛋白,饱和硫酸铵则可...
高中化学:
盐析蛋白质
怎么溶解?
答:
蛋白质
在用
盐析沉淀
分离后,需要将蛋白质中的盐除去,常用的办法是透析,即把蛋白质溶液装入透析袋内(常用的是玻璃纸),用缓冲液进行透析,并不断的更换缓冲液,因透析所需时间较长,所以最好在低温中进行。此外也可用葡萄糖凝胶G-25或G-50过柱的办法除盐,所用的时间就比较短。变性 能使蛋白质...
硫酸铵分级
沉淀的
原理【硫酸铵分级沉淀原理及实验方案】
答:
(二)为避免体积过大,可用固体硫酸氨进行
盐析
(硫酸氨用量参考表 1 );硫酸氨
沉淀法
与层析技术结合使用,可得到更进一步纯化的抗体。今天作的实验是利用硫酸铵
沉淀蛋白质
,从之前作过的经验知道,这一个
步骤
是有名的烦,要慢慢用敲的把硫酸铵缓缓的加入蛋白质溶液中。相关的原理可以在庄荣辉学习网站...
请问使
蛋白质沉淀的方法
有几种?
答:
1、
盐析法
在蛋白质溶液中加入大量的中性盐以破坏
蛋白质的
胶体稳定性而使其析出,这种方法称为盐析。常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等。例如用半饱和的硫酸铵来沉淀出血清中的球蛋白,饱和硫酸铵可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉淀出来,
盐析沉淀
的蛋白质,经透析除盐,仍保证蛋白质的活性。2...
有哪些有机酸根离子可使
蛋白质沉淀
答:
使蛋白质沉淀的方法:1
盐析法
,在蛋白质溶液中加入大量的硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等中性盐,破坏
蛋白质的
水化膜和中和电荷,使蛋白质颗粒相互聚集,发生沉淀。2等电点沉淀,等电点
沉淀法
是利用蛋白质在等电点时溶解度最低而各种蛋白质又具有不同等电点的特点进行分离的方法。3有机溶剂沉淀,有机溶剂...
蛋白质的盐析
答:
1、pH值
蛋白质
,酶是具有等电点的两性电解质,提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH 范围内。用稀酸或稀碱提取时,应防止过酸或过碱而引起蛋白质可解离基团发生变化,从而导致蛋白质构象的不可逆变化,一般来说,碱性蛋白质用偏酸性的提取液提取,而酸性蛋白质用偏碱性的提取液。2、盐浓度 稀...
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