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流式细胞仪细胞数要求
流式细胞仪
检测细胞凋亡需要多少体积的细胞
答:
1.收集细胞{数目约(1~5)×10 6个/mL},500 1000 r/min离心5min
,弃去培养液.2.3ml PBS洗涤1次.3.离心去PBS,加入冰预冷的70 的乙醇固定,4℃,1—2小时.4.离心弃去固定液,3mlPBS重悬5 min.5.400目的筛网过滤1次,500—10 00r/min离心5min,弃去PBS.6.用1ml PI染液染色,4℃避光30...
流式细胞仪
检测细胞凋亡需要多少体积的细胞?
答:
1.
收集细胞{数目约(1~ 5)×10 6个/mL},500 ~ 1000 r/min离心5min
,弃去培养液。2. 3ml PBS洗涤1次。3. 离心去PBS,加入冰预冷的70 的乙醇固定,4℃,1—2小时。4. 离心弃去固定液,3mlPBS重悬5 min。5. 400目的筛网过滤1次,500—10 00r/min离心5min,弃去PBS。6. 用1ml...
流式细胞仪
分选细胞需要多大的细胞量
答:
96孔盘单个细胞分选
,目标细胞只要96个。如果阳性率是50%,那几百个细胞就可以了,如果阳性率不到1%,那几万个细胞也不一定能选出来。或者,阳性率有20-30%,但是下游实验需要几百万个细胞,那你需要几千万的细胞才可以满足。
流式细胞仪
一次实验计多少个events
答:
这个要看你的实验要求和样本的情况了。
普通的样本,如果只是比较阳性细胞的百分率,而且目标细胞的数目比较多,那一般记录一万细胞就可以了
。而在多重染色,而目标细胞是很罕见的细胞群,那就要记录数百万的events。另外,这个event,是全部event,还是设置单细胞群后的event也要根据情况来看。
流式细胞
技术的基本概念
答:
经二甲苯脱蜡到水后,再用前述方法制备单细胞悬液;
5.单细胞悬液的细胞数不应少于10000个
。流式细胞技术的应用:1.其测定细胞内DNA的变异系数最小,一般在2%以下;2.能准确地进行DNA倍体分析;3.借助于荧光染料进行细胞内蛋白质和核酸的定量研究;4.快速进行细胞分选和细胞收集;5.医学应用:免疫...
流式细胞仪
观察细胞周期样品怎样准备
答:
-20℃固定保存。(3) 细胞染色 离心收集细胞(800rpm/min),以1mL的PBS洗细胞一次,加入500uLPBS含50ug/mL溴化乙锭(PI),100ug/mL RNase A, 4℃避光孵育20分钟。(4)检测 以标准程序用
流式细胞仪
检测,汞激发波长488nm,
计数
8千个细胞,结果用软件WinMDI Version 2.9分析。
流式细胞仪
的技术参数
答:
通常用变异系数(C.V值)来表示。C.V的定义式为:C.V=σ/μ式中,σ为标准偏差,μ是平均值。在实际应用中,我们使用挖关系式σ=0.423FWHM;其中FWHM为峰在峰高一半处的峰宽值。现在市场上仪器的荧光分辨率均优于2.0%。 主要给出仪器工作时样品浓度的适用范围。一般在1010
细胞
/ml的
数量
级。...
细胞
量大于40是什么意思?
答:
可以促进细胞的生长和分裂。在生物学实验中,通常采用显微镜或
流式细胞仪
来检测和计算细胞量。此外,还可以使用荧光染色和别的生物学技术来衡量不同类型细胞的
数量
和生长速率。在控制细胞培养条件时,还需要注意控制温度、酸碱度、氧气水平等因素,以确保细胞生长环境适宜,并保证细胞的生长和活性。
做
流式细胞仪
之前,如何固定细胞?
答:
要控制得严一些才能保证最低限度不破坏a-SMA的结构。如果单测细胞凋亡和周期的话固定液多一点和固定时间长一点都影响不是太大。其实无论是做细胞周期 的乙醇固定,还是做蛋白染色的多聚甲醛固定,固定液加1mL就可以了,一般每个样品的
细胞数
都在106左右。固定液太少了不好,因为固定液的实际作用浓 ...
流式细胞仪
测增值的话需要每个细胞样本
数目
一致吗
答:
要的,而且上样前还要保证每个样本的
细胞
浓度也是一致的。
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