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泛素化蛋白电泳结果
泛素化蛋白电泳结果
怎么分析
答:
泛素化蛋白电泳结果分析:蛋白被泛素化后分子量发生变化,
一个泛素8.5kDa,蛋白可能被一个两个三个四个多个泛素标记
。就是要出现这种带才能说明被泛素化了。先进行等电聚焦电泳(按照蛋白等电点pI分离):在胶中加入双性电解质溶液,加上电场后建立稳定PH梯度,蛋白质溶液加入后建立电场,蛋白以不同PI...
蛋白质电泳
跑出一条带或俩条带怎么解释
答:
如果确定是单一的蛋白,那么有可能是被修饰了
,比如说磷酸化,泛素化,sumo化等,会改变蛋白的大小和电荷,或是发生了降解
如何检测
蛋白
是否
泛素化
?
答:
方法一:western blot and strip\x0d\x0a通过WB检测所有发生
泛素化
的
蛋白
条带,拍照后,将膜strip。然后与特定蛋白的抗体和特定泛素化位点的抗体反应,显色拍照。通过阳性条带的对比来初步判断某一特定蛋白的特定位点发生了泛素化\x0d\x0a\x0d\x0a方法二:western blot and immunoprecipitations \...
泛素化
链的长度怎么确定
答:
1、首先免疫印迹,将
蛋白
样品经SDS-PAGE
电泳
分离后,使用特异性的泛素抗体进行检测,可以得到
泛素化
链的长度信息。2、其次质谱分析,将蛋白样品进行裂解,并利用质谱技术分析泛素化链的分子量,从而确定泛素化链的长度。3、最后纤维化,利用特异性的泛素化链结合蛋白,如Sequestosome可以富集泛素化链的样品,...
泛素化
经常wb显不出来
答:
3、
泛素化
水平低:目标
蛋白
的泛素化水平很低,导致难以检测。可以尝试增加样品加载量或者使用更敏感的检测方法(如超敏感ECL底物)来增强信号。4、实验条件问题:实验条件需要优化,包括
电泳
和转印条件等。确保电泳和转印过程中操作正确,并选择合适的电压和时间。
蛋白
位点的修饰会引起分子量偏高吗?
答:
泛素化
修饰在
蛋白质
的赖氨酸残基上添加一个泛素分子(约8.5 kDa)或多个泛素分子,引起显著的分子量增加。3.糖基化:糖基化通过添加一个或多个糖分子到蛋白质上,导致分子量增加,具体取决于添加的糖链种类和数量。这些修饰可能对蛋白质的迁移性产生显著影响,例如在凝胶
电泳
等技术中,修饰过的蛋白质...
构建标签
蛋白
,因为没有内源性抗体,所以就用标签WB检测,怎么都检测不...
答:
in vitro ubiquitin-binding assay将我们要研究的
蛋白
(被
泛素化
的蛋白)基因转染293细胞大量表达后提纯。或者直接提取内源性蛋白。在体外与K63- or K48-linked ubiquitin chain petides孵育,然后通过SDS
电泳
并用泛素化抗体进行检测。这一方法可以明确要研究的蛋白哪个赖氨酸残基容易发生泛素化。
如何从真核微生物中获取一已知氨基酸序列的
蛋白质
水解酶基因_百度知 ...
答:
①泛素:含有76个氨基酸残基,分子量约8.5kDa,广泛存在于真核细胞(原核细胞中尚未发现)。泛素链与
蛋白
底物的结合形成被蛋白酶体降解的识别信号。另外,
泛素化
在蛋白的内吞和外泌作用中有目标定位功能。②泛素活化酶E1:通过半胱氨酸残基与泛素C端活化的甘氨酸残基形成硫酯键,E1-泛素中间体中的泛素可以转移给数个E2s...
急需KKay小鼠的资料!
答:
结果
:高脂喂养12周后C57BL/6J小鼠出现胰岛素抵抗,KKAy小鼠出现肥胖和糖尿病。2型糖尿病组IRS-1的表达显著低于正常对照组和胰岛素抵抗组(P<0.05),而IRS-1的
泛素化
水平则显著高于胰岛素抵抗组(P<0.05),与对照组无显著性差异(P>0.05)。结论:2型糖尿病时IRS-1的表达下调,IRS-1泛素化水平...
如何获取基因组特定位置的组
蛋白
答:
染色质免疫沉淀法(Chromatinimmunoprecitation,ChIP)是研究体内DNA与
蛋白质
相互作用的重要工具。它可以灵敏地检测目标蛋白与特异DNA片段的结合情况,还可以用来研究组蛋白与基因表达的关系。核小体组蛋白可以发生多种翻译后的共价修饰,如乙酰化、甲基化、磷酸化、
泛素化
等,这些共价修饰与真核基因的表达...
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