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泛素化蛋白电泳结果怎么分析
泛素化蛋白电泳结果怎么分析
答:
泛素化蛋白电泳结果分析:
蛋白被泛素化后分子量发生变化,一个泛素8.5kDa,蛋白可能被一个两个三个四个多个泛素标记
。就是要出现这种带才能说明被泛素化了。先进行等电聚焦电泳(按照蛋白等电点pI分离):在胶中加入双性电解质溶液,加上电场后建立稳定PH梯度,蛋白质溶液加入后建立电场,蛋白以不同PI...
如何
检测
蛋白
是否
泛素化
?
答:
通过阳性条带的对比来初步判断某一特定
蛋白
的特定位点发生了
泛素化
\x0d\x0a\x0d\x0a方法二:western blot and immunoprecipitations \x0d\x0a通过免疫共沉淀方法将某一特定蛋白以及与其结合的蛋白分离出来。分离出来的蛋白再进行SDS
电泳
和western blot
分析
。这一方法可以明确具体哪个蛋白的哪个赖氨酸...
蛋白质电泳
跑出一条带或俩条带
怎么
解释
答:
如果确定是单一的
蛋白
,那么有可能是被修饰了,比如说磷酸化,
泛素化
,sumo化等,会改变蛋白的大小和电荷,或是发生了降解
泛素化
链的长度
怎么
确定
答:
1、首先免疫印迹,将
蛋白
样品经SDS-PAGE
电泳
分离后,使用特异性的泛素抗体进行检测,可以得到泛素化链的长度信息。2、其次质谱分析,将蛋白样品进行裂解,并利用质谱技术
分析泛素化
链的分子量,从而确定泛素化链的长度。3、最后纤维化,利用特异性的泛素化链结合蛋白,如Sequestosome可以富集泛素化链的样品,...
构建标签
蛋白
,因为没有内源性抗体,所以就用标签WB检测,
怎么
都检测...
答:
分离出来的
蛋白
再进行SDS
电泳
和western blot
分析
。这一方法可以明确具体哪个蛋白的哪个赖氨酸残基发生了
泛素化
修饰。方法三:in vitro ubiquitination assay将要研究的目的基因转染293细胞waei使其大量表达。24h后提取并分离目的蛋白。在体外反应buffer中将我们要研究的蛋白A(被泛素化的那个蛋白)与UBE1Ube...
泛素化
经常wb显不出来
答:
3、
泛素化
水平低:目标
蛋白
的泛素化水平很低,导致难以检测。可以尝试增加样品加载量或者使用更敏感的检测方法(如超敏感ECL底物)来增强信号。4、实验条件问题:实验条件需要优化,包括
电泳
和转印条件等。确保电泳和转印过程中操作正确,并选择合适的电压和时间。
如何
从真核微生物中获取一已知氨基酸序列的
蛋白质
水解酶基因_百度知 ...
答:
在适宜温度下细胞内的H2A被
泛素化
,在敏感温度下其泛素化则被抑制。组
蛋白
H2A的泛素化需要ATP,在敏感温度下泛素化速度减慢。在野生型或ts85突变细胞中均未观察到这种现象。基于H2A在ts85突变细胞中的泛素化现象,Varshavsky等证实了ts85细胞中温度敏感性组分是E1。 上述ts85细胞系的研究工作奠定了泛素参与细胞周期调控...
机体能否利用经消化系统吸收的外源性短肽来合成
蛋白
?
答:
利用现成的短肽合成新的
蛋白
,以目前的学科发展认知水平来讲,在人体内几乎不可能。我们可以看到,正常的蛋白合成的路子是mRNA翻译的
结果
,这个过程中,只有AA,没有短肽什么事情。唯一有可能掺入的就是翻译后修饰过程中的蛋白剪切和修饰,比较有名的就是
泛素化
,另外有一个类似的途径也是在蛋白上标记Tag...
张学敏近5年发表主要学术论文
答:
接着,Cui等人的研究通过
蛋白质
组学方法,鉴定出引发体液免疫反应的人类急性白血病抗原,发表在Molecular and Cellular Proteomics,2005年,卷4,1718-1724页。Man等人在Nuclear Acid Research上阐述了PIAS3如何通过促进PRB的
泛素化
修饰,抑制其转录激活,发表于2006年,卷34,第19期,5552-5566页。此外,...
酵母双杂交的改进版本
答:
ER中错误折叠
蛋白
的积累会诱导酵母ER I类跨膜蛋白(Ire1p)形成二聚体,后者诱导Hac1p转录,其产物可激活分子伴侣的转录。在SCINEX-P系统中,目的蛋白与缺少位于腔内的N末端寡聚化结构域的Ire1p突变蛋白(ΔIre1p)融合。两种杂合蛋白的互作会引起Ire1p蛋白二聚体的重构,从而激活UPR下游信号转导...
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