55问答网
所有问题
当前搜索:
核酸分离的方法
核酸的分离方法
有什么?
答:
首先需要对核酸进行分离和纯化.核酸样品质量将直接关系到实验的成败.核酸分离、纯化原则
:1.保持核酸分子一级结构的完整性.因为遗传信息全部储存在一级结构之中,核酸的—级结构还决定其高级结构的形式以及和其他生物大分子结合的方式.2.分离核酸原则:1)温度不要过高;...
核酸分离
时为什么要除去小分子物质和脂类物质
答:
1、细胞裂解:核酸必须从细胞或其他生物物质中释放出来
。细胞裂解可通过机械作用、化学作用、酶作用等方法实现。2、酶处理:在核酸提取过程中,可通过加入适当的酶使不需要的物质降解,以利于核酸的分离与纯化。如在裂解液中加入蛋白酶(蛋白酶K或链酶蛋白酶)可以降解蛋白质,灭活核酸酶(DNase和RNase),DNa...
核酸
在
分离
与纯化 时,需要用那些物质?其作用是什么?
答:
1
加入浓盐溶液(如NaCl)核酸-蛋白质加入NaCl后,破坏静电吸力,使氢键破坏,核蛋白解聚
;2 加入SDS SDS除有破胞和抑制核酸酶的作用外,还具有使核酸从蛋白质上游离出来的功能;3 酚/氯仿抽提 酚/氯仿混合使用能增加去除蛋白的效果,并对核酸酶有抑制作用。氯仿比重大,能加速有机相与水相分层...
如何
分离核酸
蛋白和有机物,活性物质,次生代谢物质?
答:
(1) 2%CTAB抽提缓冲液在65℃水浴中预热。(2)取少量实验材料(约300mg)置于研钵中,用液氮磨至粉状;(3) 加入700ul的2%CTAB抽提缓冲液,轻轻搅动;(4) 将磨碎液分倒入1.5 ml的灭菌离心管中,磨碎液的高度约占管的三分之二;(5)置于65℃的水浴槽或恒温箱中,每隔10 min轻轻摇动,30~60min后取...
不同大小的
核酸
条带怎么
分开
答:
不同大小的核酸条带可以使用电泳法进行分离
,具体方法如下:1. 可以使用低电压,长时间,高浓度的DNA胶,进行电泳。2. 可以使用相对长的电泳胶,例如15-30cm的。3. 在电泳最后,可能会出现条带不清晰的情况,可以在电泳槽的正极端添加EB,这样条带又会变得清晰。4. 如果实在区分不开,可以使用酶切...
核酸
提取
的方法
有哪些?
答:
通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使
核酸分离
出来。CTAB提取缓冲液的经典配方Tris-HCl (pH8.0)提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏;EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子,抑制DNase活性;NaCl 提供一个高盐环境,使DNP充分溶解,在于液相中; CTAB溶解细胞膜,并结合核酸,使核酸便于分离;...
动物肝脏
核酸分离
应注意什么
答:
核酸
提取
分离方法
核酸提取分为传统方法和商业化试剂抽提。传统
的方法
一般会采用酚/氯仿抽提及乙醇沉淀来提取核酸。商业化试剂盒方法提取核酸,比较经典的是采用离心柱法,将硅胶膜固定在离心管中,通过离心力或者负压让液体通过硅胶膜,核酸就留在膜上。在经过洗涤、洗脱的步骤得到核酸。商业化试剂盒的应用...
简述
核酸分离的
基本 原理?
答:
通过机械磨碎细胞或加入表面活性剂裂解细胞使内容物提取出来,再加入蛋白变性剂变性沉淀蛋白质。最后靠
核酸
在醇溶液中溶解度下降的特点提取纯的核酸。
在实验中,经常提取
核酸的
时候有很多
方法
,其中磁珠法是什么意思,有什么...
答:
传统的核酸分离技术包含沉淀,离心等过程,这些纯化方法的步骤繁杂、费时长、收率低,接触有毒试剂,很难实现自动化操作;而采用磁性载体微球分离技术就能很好地克服这些缺点,实现样品的快速、高效制备.磁珠法提取核酸是通过
细胞裂解
液裂解细胞,从细胞中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面,而蛋白...
酵母核糖
核酸的分离
和鉴定。实验原理
答:
RNA 提制过程首先要使RNA 从细胞中释放,并使它和蛋白质
分离
,然后将菌体除去。再根据
核酸
在等电点时溶解度最小的性质,将pH 调至2.0~2.5,使RNA 沉淀,进行离心收集。然后运用RNA 不溶于有机溶剂乙醇的特性,以乙醇洗涤RNA 沉淀。 提取RNA
的方法
很多,在工业生产上常用的是稀碱法和浓盐法。浓盐法是在加热的...
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
其他人还搜
核酸分离鉴定的方法
核酸纯化的常用方法
核酸类药物分离纯化方法
核酸纯度测定方法
pcr原理
常见的分离和纯化核酸的方法
核酸的分离提取方法
核酸分离纯化的基本方法和原理
核酸分离的主要步骤