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悬浮细胞状态不好怎么办
...生长
状态
很
不好
,有许多
细胞
残骸,该细胞又是半
悬浮
细...
答:
这个细胞需要营养很高,
你先用含10%胎牛血清的培养基培养几次
,状态好后,慢慢降低胎牛血清含量,慢慢驯化为能适应于小牛血清的培养基。现在有较多细胞碎片,建议离心下细胞。也有可能是细胞量多,营养物质跟不上。通过传代适当降低细胞数量,或者提高培养基里的血清浓度 ...
悬浮细胞
一般几天离心一次,如何养呢?
答:
若你不想每天都去管它,
你可以把细胞密度中的相对稀一点(不能太稀
,太细 了细胞不好好长),
可以2-3天换一次液(半量,不用离心)
,这要看细胞状态,和你试验进度,若你急着用细胞,那就将细胞中密一点,天天换液,用胎牛血 清,这样细胞会疯长的。要是比较娇气的细胞,象RPMI-8226,一定要...
细胞
消化过度了有什么好的办法补救吗
答:
如果是可以恢复的你只要好好继续培养就行
;而不能恢复的话状态不好的细胞以后会挂,换液除去漂浮的死细胞就行了,一般不用特意去除状态不好的细胞。
如何把
细胞
铺的更均匀
答:
细胞要尽量打散,大部分呈单个状态。离心后,要充分悬浮!还有转移到六孔板后,是要晃得
。晃的时候最好不要让那个细胞液转圈,不然细胞就全被带到中间去了,就会不均匀。一瓶细胞长满后,正常处理,在培养瓶里吹匀。然后铺 6 孔板,每孔 2 毫升,铺完之后不用观察直接用酒精棉擦拭。然后放到培养箱...
细胞
培养中出现黑点是污染吗,
如何处理
答:
如果判定黑点是污染,请及时将细胞处理后丢弃
。其他情况,可参照以下进行:如果是悬浮细胞:
收集细胞上清慢速离心
(500-600 rpm/min,5-6 min)并更换新的培养瓶;如果是贴壁细胞:将细胞用PBS洗2-3遍,洗的时候,轻轻拍打培养瓶,让贴壁不牢的碎片和颗粒脱落,再弃去PBS,消化时先加低浓度的胰酶如0....
在
细胞
培养的过程中注意事项有哪些
答:
可能培养时间较长,营养不足,死亡
细胞
较多;呈紫红色时,可能是细胞生长
状态不好
或已经死亡。所以,应在培养液略黄时吸出部分旧培养液,然后补加同等数量的新鲜培养液。换液过程中,不要吸出细胞,不要使培养液溢出培养瓶,避免各种微生物的污染。换液时,应将培养液事先预温至37℃。
提
悬浮细胞
蛋白,为什么细胞密度很好,但提出的蛋白量确十分低
答:
细胞总蛋白提取量少原因很多 比如可能是该
细胞状态不好
,造成表达量偏低,提取后蛋白总量就会少 蛋白与蛋白间性质差异大,因为所需的细胞提取液不一样,会造成一些蛋白不能溶解于提取液中而和细胞碎片一起沉淀掉 不同的提取方法不一样
细胞
复苏、 换液、传代、 冻存protocol
答:
如果是贴壁细胞,可以用全量换液法,直接吸去全部旧培养基,补充足量新鲜完全培养基。 如果是
悬浮细胞
,可以用半量换液法,即吸去一半旧培养基,补充新鲜完全培养基。(会损失一半细胞)。悬浮细胞如果不想损失细胞,那就需要将培养物转移到离心管中,离心去除旧培养基,再用新培养基重悬细胞沉淀。 不光细胞维持培养时需要...
细胞
经常染菌是因为培养瓶吗
答:
我培养的是单克隆细胞,最近发现几乎所有细胞瓶中的
细胞状态
极差,细胞上清比较浑浊.有以下几点现象,很
不好
判断是不是染菌.1、细胞较少的时候,细胞贴壁生长,上清中
悬浮
很少量的细胞,可以认为是正常的.2、细胞长多了之后,上清中悬浮的细胞增多(多的有些异常),会有一小团一小团的细胞聚集在上清中,很多...
动物
细胞
培养,为什么要细胞贴壁生长
答:
培养细胞有3种
状态
:贴壁、半贴壁、悬浮。对于贴壁生长的细胞来说,如果培养过程中发现
细胞悬浮
,则说明细胞生长
不好
或者死亡。对于另两类细胞来说,悬浮没什么不可以。 细胞贴壁生长时细胞生长的属性,贴壁生长的细胞还会抑制其增殖和活性,所以人们还要通过用稀释,分离,蛋白酶处理等方法使它们继续生长繁殖...
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