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怎样将目的基因导入载体
将目的基因导入
植物细胞的方法
答:
1、农杆菌转化法:将目的基因插入到经过改造的T-DNA载体上
,通过农杆菌的感染将目的基因导入植物细胞。2、基因枪法:用高速动力装置把吸附了外源DNA的微型金粒高速射击到受体细胞,使微粒及附着的DNA分子进入细胞,并实现转化。3、
花粉管通道法
:在授粉后向子房注射合成的DNA溶液,利用植物在开花、受精过...
将目的基因
构建在表达
载体
上的方法有哪些
答:
有两种常用的方法。
第一种是直接将PCR扩增的基因片段酶切,然后连接到酶切过的表达载体上
。第二种是先把PCR产物连到过度载体上,再从过度载体抢切下目的基因,最后再连接到酶切过的表达载体上。
常用的
目的基因
与
载体
的连接方法有哪些
答:
第一种方法是,
用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段
;(人教版高中生物选修3中提到的E·coliDNA连接酶,来源于大肠杆菌,可用于连接粘性末端;T4DNA连接酶,来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低。)第二种方法是,用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来,或是用末端脱...
求教:2个
目的基因如何导入
一个
载体
答:
基因操作过程中使用运载体有两个目的:一是用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去
;二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制(称为克隆).携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后,停留在细胞中进行(自我复制)或整合到细菌拟核DNA中,随着拟核DNA的复制而复制.载体除了质粒以外,还有噬菌体载...
如何
用标记基因检测
目的基因导入载体
答:
因为标记基因和目的基因同位于运载体上,要导入都导入,要表达则都会表达
。检测分三种,首先是通过对标记基因的检测,通常用DNA分子杂交技术,来检验标记基因是否成功的导入受体细胞。或者用分子杂交技术,来看目的基因导入后是否成功转录出信使RNA。最后可以用抗原-抗体检验,来验证导入基因是否成功表达。
基因工程的基本操作程序
将目的基因导入
受体细胞
答:
具体操作是先
将目的基因
插入T-DNA,再用农杆菌感染植物细胞。动物细胞通常使用显微注射法。首先,将目的基因表达
载体
纯化并准备受精卵或卵细胞。然后,通过显微注射技术将载体直接注入卵细胞中,形成早期胚胎。最后,将胚胎移植到雌性动物子宫内,发育成为新个体。总的来说,基因工程通过这些精细的操作程序,...
如何
构建
载体
答:
载体
构建目的 ①用它作为运载工具,
将目的基因
转移到宿主细胞中去。②利用他在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制(称为克隆)。理想的运载体是质粒(plasmid),在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体。具体过程详解如下图所示:
目的基因导入
微生物的方法
答:
将目的基因导入
微生物的方法是:Ca2+处理法(感受态细胞法或CaCl2法)。主要原理就是通过处理使细胞的通透性变大,使得细胞膜表面出现一些孔洞,便于外源基因或
载体
进入感受态细胞。由于细胞膜的流动性,这种孔洞会被细胞自身所修复。例子:大肠杆菌的转化实验 ...
目的基因如何
整合到动物细胞的染色体DNA上
答:
鉴于精子
载体
法存在较大争论,Anthony等(1999)尝试一种新方法:预先将小鼠精子进行破膜处理,与编码绿色荧光蛋白GFP或B-半乳糖苷酶报道分子的外源DNA短时间(1min)共孵育,然后徽注射入减数分裂II期的卵母细胞质中,取得64%——94%转
基因
表达胚胎,并揭示精子与外源DNA在注射前已结合。将转GFP的...
将目的基因导入
受体细胞的方法有哪些
答:
常用方法:基因工程中常用的受体细胞有大肠杆菌,枯草杆菌,土壤农杆菌,酵母菌和动植物细胞等。其中,对于细菌或植物细胞,常用质粒作为
载体将目的基因导入
细胞内;动物细胞则用显微注射的方法将目的基因导入动物受精卵的雄性原核中。过程:用人工方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞,主要是借鉴细菌或病毒...
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