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怎么知道浓缩胶凝固了
tricine sds page 为什么
浓缩胶
总是不凝呢?
答:
检查一下AP和TEMED 1.AP有可能是吸水结块了 或者是被氧化了 配的时候尽量去中间的部分 可以试试加大AP的量
2.TEMED吸水或氧化了 看看颜色是否已经很黄了 如果是就要换新的 3.可以试试将胶放入烘箱 30℃ 可以加快凝胶凝固 以上都是我试验的经验啊 做了很久才把这个问题解决 ...
wb玻璃板
怎么
清洗
答:
当水和胶之间有一条折射线时,说明胶已凝了
。再等3min使胶充分凝固就可倒去胶上层水并用吸水纸将水吸干。配 4% 的浓缩胶, 加入 TEMED 后立即摇匀即可灌胶。将剩余空间灌满浓缩胶然后将梳子插入浓缩胶中。待到浓缩胶凝固后,两手分别捏住梳子的两边竖直向上轻轻将其拔出。用水冲洗一下浓缩胶,将...
制胶的时候上层
浓缩胶
制少了,下层多了,但是梳子插得进去,在跑的时候怎...
答:
等
浓缩胶凝固
后(1小时以上,分离胶可以凝固时间短一点,半小时基本就可以了,做好浓缩胶放置时间最好长一点,这样跑出的胶条带才清晰好看),把梳子取出,用干净的纸把残留在样品空旁边的胶小心擦掉,注意不要堵塞样品孔在做的时候胶不要加的太满,因为要加梳子会有胶溢出,胶两侧的残胶会很多,处...
做好westernblot需要注意各种细节,转给需要的你!
答:
加入TEMED混匀后立即灌胶,同上用1ml枪头从左至右轻轻加入
浓缩胶
,加满后冲洗10孔梳子,水平轻轻插入浓缩胶中静置待其
凝固
。可将剩余的浓缩胶沿着梳子加入玻板中以完全密封。 3.此时,可将之前分装好的煮过的加入loading buffer的蛋白样品、预染的蛋白maker 和一小支loading buffer 置于4℃融化。 Little Trick 1.AP...
wb实验的原理和步骤
答:
待到
浓缩胶凝固
后,两手分别捏住梳子的两边竖直向上轻轻将其拔出。 5. 用水冲洗一下浓缩胶,将其放入电泳槽中。 6. 在电泳槽的上、下槽中加入1×Tris-甘氨酸或SDS电泳缓冲液,上样。 7. 连接电泳槽到电泳仪。上槽接负极,下槽接正极,通电起始电压70~ 80V,10min后100V,电泳2h或当溴酚蓝迁移至离底部1cm时...
wb配
胶
出现三层
答:
1、首先wb配胶,先配分离胶,再配
浓缩胶
出现三层。2、其次分离胶里含的促凝剂含量较小,灌胶体积也较大,灌好胶要半小时左右才能
凝固
。3、最后浓缩胶里含的促凝剂含量较大,灌胶体积也较小,灌好胶十分钟左右就能凝固。
western-blot
胶
不
凝固
是什么原因啊
答:
1,复查一遍
浓缩胶
,分离胶各buffer的组分是否配制有误,特别是pH,现在气温上升,原来冬天配制的溶液的pH和现在可能会相差很多,建议复查,如果pH不对,重新配过。一般情况下,对于pH有要求的溶液,季节更换的时候,基本要重新配过的。原来以贮存液形式存在的溶液,在稀释用作工作液的时候,也要特别注意...
在做聚丙烯酰胺凝胶电泳时为什么分离胶可以
凝固
,但
浓缩胶
很长时间...
答:
分离胶一般40来分钟凝好,
浓缩胶
一般要90分钟 想快一些你可以在旁边放个电炉提高温度,或多加适量的催化剂。
wb下层
胶
多久
凝固
答:
wb下层胶一般30分钟左右凝固。注意下层
胶凝固
的时间和配胶环境的温度有关,温度太低胶凝固的相对较慢,还和促凝剂的新鲜程度有关,若促凝剂(ap)配制时间太久,胶凝固的速度也会变慢。
marker电泳条带为什么会这样
答:
4. 按说明书配积层胶,加入 TEMED 后立即摇匀即可灌胶。将剩余空间灌满浓缩胶然后将梳子插入浓缩胶中。灌胶时也要使胶沿玻璃板流下以免胶中有气泡产生。插梳子时要使梳子保持水平。由于胶凝固时体积会收缩减小,从而使加样孔的上样体积减小,所以在
浓缩胶凝固
前最好在两边补胶至刚刚冒顶。待到浓缩...
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