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层析柱装填注意事项
层析
填料要一次性填完吗
答:
层析填料装柱的注意事项:
1、装柱前要仔细看填料的使用说明书
,每种填料都有自己的特性,以及特殊的装柱方法,针对不同的空柱,也要注意方法可能不同;2、填料要加水搅拌成均匀悬液,悬液浓度依填料而不同,一般70-85%,迅速倒入空柱内,或吸或压,流速和具体步骤看说明书。3、这一点非常重要:装...
柱层析
二,装柱方法
答:
干法装柱则是直接填入硅胶,敲打
柱子
使其紧密,然后用油泵抽装,同样要求柱子结实。接着通过淋洗剂“走柱子”以清洗。干法操作简便,但可能会在“走柱子”过程中产生气泡,需要特别
注意
。解决的方法是确保硅胶紧密,使用足够多的溶剂冲洗,直到柱子下端不再发热,恢复室温后才可撤去压力。有些文献建议在硅...
硅胶
柱层析
的操作技术
答:
硅胶柱层析的操作方法及注意事项 :
装柱 操作要点:装柱前柱底要垫一层脱脂棉以防吸附剂外漏
。 有干法装柱和湿法装柱两种方法 (1)干法装柱:将硅胶通过漏斗装入柱内,中间不应间断,形成一细流慢慢加入管内。也可用橡皮槌轻轻敲打柱硅胶柱使硅胶装填连续均匀、紧密。柱装好后,打开下端活塞,然后...
葡聚糖凝胶
层析
填料的问题
答:
在进行层析柱装填时,
匀浆液浓度必须在一定的范围内(百分之五十至百分之七十),方可保证沉降均匀、柱效好
,这对层析柱的规格选型有着特殊要求。
色谱
柱装填
紧密与否对分离效果有何影响?
答:
但如果装时过分敲击,色谱柱填装过紧,又使流速太慢。影响层析柱整体渗透速度分布不均,致使色素带不是整齐的环状色素带,进而增长分离各色素的时间,应在
装填层析柱
前用适量的丙酮润洗一下,后在装入氧化铝时应边加边敲打层析柱使氧化铝殷实,然后用真空抽滤方法,用乙醚进行抽滤至无气泡为止。
层析柱
为什么要控制液面高度
答:
层析柱
控制液面高度可以保持效果。层析柱装柱不平,导致蛋白分离过程中分离效果不好,造成拖尾现象,分不开,应让柱面上一直保持有一定高度的液面,让硅胶自由沉降而填实。
层析柱
谱图前倾怎么办
答:
1.吸附剂的处理及
柱子装填
:将一定量薄层
层析
硅胶装入搪瓷盘置于烘箱中,于105。C活化2H后,取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充,填满整个柱体,不留死体积,密封后用柱塞式计量溶剂泵按丙酮一石油醚(5:95)比例泵入溶剂,至溶剂流出止。2.上样:将冬凌草的乙醇提取物400G用适量丙酮溶解,泵入...
蛋白质的纯化实验
答:
1. 进行分子量测定前一天,请先以buffer A-150 流洗100 mL,并检查胶
柱
内有无气泡产生,若有严重的气泡或干裂,必须重新
装填
管柱。2. 取标准分子量溶液0.4 mL,加上纯质目标酶0.5 mL (以亲和
层析
法所得的AF 部份),如上法注入管柱中,立刻开始进行胶体过滤,并收集各分划。请依循上述所有管柱及分划收集器的...
层析柱
标柱不合格的因素有哪些
答:
2.强保留样品组分 强吸附性的样品组分吸附在柱头填料上,能严重地影响液相色谱仪色谱柱寿命。像生物组织或体液的提取物、天然产物等复杂样品,易造成柱头的污染。相对较纯的样品,一般不会出现这一问题。色谱柱应用中,色谱峰严重拖尾或分裂往往是强保留污染物在柱头吸附的体现。3.色谱
柱装填
不良 装填不良...
硅胶
柱层析
的操作技术
答:
硅胶柱层析的操作方法及注意事项 :装柱 操作要点:
装柱前柱底要垫一层脱脂棉以防吸附剂外漏
。 有干法装柱和湿法装柱两种方法 (1)干法装柱:将硅胶通过漏斗装入柱内,中间不应间断,形成一细流慢慢加入管内。也可用橡皮槌轻轻敲打柱硅胶柱使硅胶装填连续均匀、紧密。柱装好后,打开下端活塞,然后...
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