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大肠杆菌质粒培养
大肠杆菌
提
质粒
要摇多久
答:
12小时。
大肠杆菌提质粒
需要将转染过的大肠杆菌放进AMP-LB液体
培养
基,将摇瓶放置于37℃恒温培养箱中培养12小时,通过离心力将大肠菌沉淀到培养基的底部,倒掉上清后,用冰的75%乙醇洗沉淀,除去上清后,用氯化镁溶液沉淀RNA,提取质粒。
大肠杆菌质粒
转化涂板时,为什么要在菌液完全被
培养
基吸收后,进行倒置培 ...
答:
大肠杆菌质粒
转化涂板时,要在菌液完全被
培养
基吸收后,进行倒置培养的原因:恒温培养时,培养基中的水分会以水蒸汽的形式蒸发,倒置培养皿则会使水蒸汽凝结成水滴留在盖上。如果正方,则水分形成的水滴会落入培养基表面并扩散开。如果培养皿中已形成菌落,则会导致菌随水扩散,很难再分成单菌落,达不...
大肠杆菌质粒
的提取
答:
1、接1%含
质粒
的
大肠杆菌
细胞于2ml LB
培养
基。2、37℃振荡培养过夜。3、取1.5ml菌体于Ep管,以4000rpm离心3min,弃上清液。4、加0.lml溶液I(1%葡萄糖,50mM/L EDTA pH8.0,25mM/L Tris-HCl pH8.0)充分混合。5、加入0.2ml溶液 II(0.2 mM/L NaOH,1% SDS),轻轻翻转混匀,置于冰...
大肠杆菌培养
多久提取
质粒
比较好?
答:
一般是OD 600 大于1.5,如果是37度少量
培养
一般是1-2天,这和你用的是什么菌株,培养温度,通气量,接种量,
质粒
的拷贝数等等都有很大关系,所以还是具体问题具体分析的好
质粒
转
大肠杆菌培养
多少时间能长出来
答:
这个要看您的
质粒
是否为常规质粒,如果说您的质粒上含有不利于
大肠杆菌
生长的基因,要是没有的话常规
培养
只需要6-12小时以内就可以看到适宜大小的菌落,要是有的话就不好说了,还有就是还会与您培养基中加入的抗生素的种类和数量有一定的关系,建议您咨询师兄或者是师姐更为合适,因为干扰因素太多,无法...
把目的
质粒
放到
大肠杆菌
中表达
培养
的方法叫什么的,有几种方法,及其原理...
答:
转化 目前实验室常用的主要有热激转化和电转化 热激转化主要运用氯化钙处理
大肠杆菌
细胞,使其细胞壁细胞膜出现“穿孔”,这样通过冰浴及热激作用将重组
质粒
转进细胞内。点击转化则主要通过短时高压使细胞“穿孔”进而将重组质粒导入细胞。
重组
质粒
已成功转入
大肠杆菌
内,-20°冻存,怎样复活,扩大
培养
?
视频时间 1:10
大肠杆菌
怎么
培养
的
答:
大肠杆菌
一般
培养
方法 使用牛肉膏蛋白胨培养基 组成成分:牛肉膏 3g,蛋白胨 10g,Nacl 5g,琼脂 15~20g,水1000mL,PH7.4~7.6。具体配置步骤:1.称药品 按实际用量计算后,按配方称取各种药品放入大烧杯中.牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶解后倒入大烧杯;也可放在称量纸上称量,随后放入...
有谁知道
大肠杆菌
的详细
培养
方法?
答:
培养大肠杆菌
用LB培养基。LB培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求.培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌.通过培养工程菌,我们可以表达大量的外源蛋白,也可以拿到带有外源基因的
质粒
,工程菌的有效扩增是生化分子实验的...
用什么方法可以得到
大肠杆菌
的
质粒
?
答:
kb大小的片断,就没有办法再被 PDS共沉淀了,所以碱处理的时间要短,而且不得激烈振荡,不然最后得到的
质粒
上总会有大量的基因组DNA混入,琼脂糖电泳可以观察到一条浓浓的总DNA条带。75%酒精主要是为了清洗盐份和抑制Dnase;同时溶液III的强酸性也是为了使DNA更好地结合在硅酸纤维膜上。
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