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吸光度与蛋白质含量的关系
紫外吸收法测定
蛋白质浓度的
基本原理是什么?
答:
通过测量溶液的吸光度(Absorbance,A),可以评估蛋白质的浓度。根据比尔定律(Beer-Lambert定律),
吸光度与蛋白质的浓度成正比
。具体来说,比尔定律描述为:A=ε×c×l 其中:A 是吸光度。ε 是摩尔吸光系数,表示特定波长下,特定物质每摩尔吸收的光量。c 是物质的浓度(摩尔/升)。l 是光通过...
紫外吸收法测定
蛋白质含量
答:
吸收高峰在280nm处,
其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比
。此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,可以进行蛋白质含量的测定。
紫外吸收法测定
蛋白质含量
答:
蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质,吸收高峰在280nm处,其
吸光度
(即光密度值)
与蛋白质含量
成正比。各种蛋白质的这三种氨基酸的含量差别不大,因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的紫外吸收法。该法测定范围为0.01~1.0 mg/...
蛋白质浓度
越大紫光
吸光度
越大吗
答:
理论上来说蛋白质浓度越大在紫外光280纳米吸光度就越大
,但是任何紫外分光光度计都有量程上限的,超出上限后再提高浓度吸光度也不再发生变化。另外有些蛋白质因为结构比较特殊,可能在280纳米处吸光度并不敏感,也就是浓度提高很多之后吸光度并无明显的变化也会有可能的。
考马斯亮蓝法测定
蛋白质的
公式是什么???
答:
在一定的蛋白质浓度范围内,
蛋白质一染料复合物在595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比
,因此可用于蛋白质含量的测定。测定时,用同一种标准蛋白(自己选,如牛血清白蛋白,所选的标准蛋白最好是纯化的待测蛋白——但这是理想状态,一般选择氨基酸构成与待测蛋白相近的标准蛋白。否则将影响测定结果)配制...
bca法测
蛋白浓度
原理
答:
该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性,
吸光度和蛋白浓度
在广泛范围内有良好的线性
关系
,因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。实验试剂 (1) BCA试剂的配制 ① 试剂A,1L:分别称取10g BCA (1%),20g Na2CO3·H2O(2%),1.6g Na2C4H4O6·2H2O(0.16%),4g NaOH (0.4%) ,9.5g NaHCO...
可溶性
蛋白质含量的
测定
答:
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blueG-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465nm,后者在595nm在一定蛋白质浓度范围内(1-1000μg)),蛋白质与色素结合物在595nm波长下的
吸光度与蛋白质含量
...
蛋白质
定量:(BCA法)
答:
实验原理BCA(bicinchoninicacid)是一种稳定的水溶性复合物,在碱性条件下,二价铜离子可以被蛋白质还原成一价铜离子,一价铜离子可以和BCA相互作用,两分子的BCA螯合一个铜离子,形成紫色的络合物,该复合物为水溶性,在562nm处显示强吸光性,在一定浓度范围内,
吸光度与蛋白质含量
呈良好的线性
关系
,制作...
紫外吸收法测定
蛋白质含量的
原理
答:
在紫外分光光度法中,蛋白质中的肽键在280nm处有强烈的吸收。通过测定溶液在280nm处的
吸光度
,可以确定蛋白质
的含量
。此法的优点是灵敏度和准确度都很高,可以用于微量蛋白质的测定。4、考马斯亮蓝法 考马斯亮蓝法是一种基于染料结合法的蛋白质测定方法。此法利用的是考马斯亮蓝G-250
与蛋白质
结合的...
如何判断bca法测定
蛋白质浓度
是否符合朗伯比尔定律
答:
某些蛋白质含有二硫键,也会在280nm附近吸收紫外光。近紫外吸收法就是根据这个性质,对蛋白质进行定量。因为不同的蛋白质中所含有的色氨酸与酪氨酸的数量存在很大的差异,所以蛋白质在280nm处的
吸光度
4zso也存在非常大的差异。比如,当
蛋白质浓度
为1mg/ml时,吸光度4pso可为0-4之间的任何值。但是,...
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