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两种常用的限制性DNA内切酶
工具酶
DNA限制性内切酶
答:
根据其功能特点,
DNA限制性内切酶主要分为两种类型:Ⅰ型和Ⅱ型
。其中,Ⅱ型限制酶以其高度特异性和精准的识别能力而闻名,它们能在识别特定的核苷酸序列后,在指定位置切断DNA双链。常见的识别序列包括四核苷酸、五核苷酸、八核苷酸和六核苷酸,其中六核苷酸是最主要的类型,其识别序列具有旋转对称性。切割...
常用DNA限制性内切酶
有哪些?
答:
第一类内切酶能识别专一的核苷酸顺序
,并在识别点附近的一些核苷酸上切割DNA分子中的双链,但是切割的核苷酸顺序没有专一性,是随机的。这类限制性内切酶在DNA重组技术或基因工程中没有多大用处,无法用于分析DNA结构或克隆基因。这类酶如
EcoB、EcoK
等。第二类内切酶能识别专一的核苷酸顺序,并在该顺序内的...
限制性核酸内切酶
有哪几种类型?哪一种类型
的限制
酶最适合于基因工程,为 ...
答:
【答案】:Ⅰ类限制性核酸内切酶、Ⅱ类限制性核酸内切酶和Ⅲ类限制性核酸内切酶3类
。Ⅱ类限制性核酸内切酶最适合基因工程,因为Ⅱ类限制性核酸内切酶只由一条肽链构成,仅需Mg2+,切割DNA特异性最强,且就在识别位点范围内切断DNA。Ⅰ类和Ⅲ类限制性核酸内切酶由于切割序列是随机的,与识别序列不统一,因此...
常见的限制性核酸内切酶
有什么?具体的名字
答:
第一型限制酶 例如:EcoB、EcoK
。同时具有修饰(modification)及识别切割(restriction)的作用;另有识别(recognize)DNA上特定碱基序列的能力,通常其切割位(cleavage site)距离识别位(recognition site)可达数千个碱基之远。例如:EcoB、EcoK。第二型限制酶 例如:
EcoRI、HindⅢ
。只具有识别...
限制性内切酶
哪些
答:
II型限制性内切酶:这是最常见的一类限制性内切酶
。它们不仅能够识别特定的核苷酸序列,还具有对特定碱基对位置的切割偏好。这类酶在基因工程中被广泛应用,如DNA的克隆和基因治疗等。III型限制性内切酶:与前两类不同,III型限制性内切酶的识别序列通常较长且复杂。它们通常在DNA的甲基化区域发挥作用,参与...
限制性内切酶限制
与修饰
答:
限制酶通过甲基化作用,如腺嘌呤A变为N6甲基-腺膘呤,胞嘧啶C变为5'甲基胞嘧啶,帮助区分自身与外来
DNA
。并非所有甲基化序列都会被限制酶切割,大多数限制酶对DNA甲基化敏感,影响酶切位置。商业限制酶也发展起来,专门针对甲基化DNA进行切割。1960年代,
限制性内切酶
的概念开始形成,如1968年从E.coli K...
核酸内切酶
简介
答:
限制性内切酶
根据功能和识别序列分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型,其中Ⅱ型酶(如EcoRI)因其特异性的识别和切割
DNA
片段而广泛使用。酶的识别序列通常具有回文结构,长度为4-6个核苷酸,长度和特异性决定了产物片段的长度和复杂性。在实际操作中,酶切反应条件、底物纯度、反应时间等因素对结果至关重要。通过如病毒DNA...
常用的限制性核酸内切酶
有哪些特点?
答:
限制酶)是基因工程中常用的重要工具酶,是一类能识别双链DNA分子中特异核苷酸序列的
核酸内切酶
,
常用的限制
酶主要有以下特点:①均来自于微生物,并以其来源的微生物学名进行命名;②相对分子质量小,仅需Mg2+作为辅助因子,无需ATP;③识别特异
性DNA
双链顺序,在序列内特异切割产生特异性DNA片段;...
DNA限制性内切酶酶切
的DNA限制性内切酶
酶切原理
答:
Ⅱ类由
两种
酶组成: 一种为限制性内切核酸酶(限制酶),它切割某一特异的核苷酸序列; 另一种为独立的甲基化酶,它修饰同一识别序列。Ⅱ类中
的限制性内切酶
在分子克隆中得到了广泛应用,它们是重组
DNA
的基础。绝大多数Ⅱ类限制酶识别长度为4至6个核苷酸的回文对称特异核苷酸序列(如EcoRⅠ识别六个...
DNA限制性内切酶
消化实验中需要哪些主要试剂和器材?
答:
DNA限制性内切酶
消化实验所需试剂和器材列表 试剂:限制性内切酶: 如EcoRI、Hind Ⅲ、PstⅡ、BamH1等,需在-20℃冷藏以保持活性。
常用
样本如λDNA、pBR322等同样需储存在-20℃。限制性内切酶缓冲液: 需要根据特定酶的使用说明进行配制,用消毒双蒸水配置,储存在-20℃。具体配方如:0.89 mol/L Tris...
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