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不能被限制酶切割的序列
限制性内切酶
可
切割
RNA吗?为什么?
答:
不可以 限制性核酸内切酶是识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶
。它能识别双链分子的某种特定核苷酸序列,使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,而且只能切割DNA,不能切割RNA。另外,根据酶的专一性也能得出答案
为什么
限制性内切酶
不剪切细菌本身的DNA??
答:
因为通过长期的进化,细菌中含有某种限制酶的细胞,其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列
。或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上,使限制酶不能将其切开。这样,尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的DNA被切断,并且可以防止外源DNA的入侵。限制性内切酶能分裂DNA分子在一限定数目...
限制酶还能切割
RNA吗
答:
不能
。限制酶又称限制性核酸内切酶,专一对DNA起作用。限制性核酸内切酶是可以识别特定的核苷酸序列,并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶,简称限制酶。根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式,可将限制酶分为三种类型,分别是第一型(Type I)、第二型(Type I...
限制性内切酶能切割
DNA单链吗?
答:
限制性内切酶只能识别并切割特异的双链DNA序列
,这种能被特异性识别的切割部位都具有回文序列,也就是在切割部位,一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。我们在说一个限制性内切酶例如EcoRⅠ的酶切位点时,只是为了方便只提GAATTC,但此处的GAATTC是包含双链信息的(另一条链5'到3'...
下表中列出了几种
限制酶
识别
序列
及其
切割
位点,图1、图2中箭头表示相关...
答:
(1)酶的活性易受温度和PH的影响.(2)由图可知,在质粒的两个标记基因中都有MspⅠ的
切割序列
,在目的基因中有BamHⅠ切割序列,所以
不能
使用MspⅠ与BamHⅠ同时切割质粒与外源DNA.(3)MspⅠ与HpaⅡ会将质粒的两个标记基因都破坏,所以不能用这两种
限制酶
,BamHⅠ会将目的基因破坏,所以排除,可...
限制性内切酶
只能识别回文的核苷酸
序列
吗?
答:
不是
限制酶
识别
的序列
大多数为回文对称结构,
切割
位点在 DNA 两条链相对称的位置。 EcoRⅠ 和 HindⅢ 的识别序列和切割位置如下。EcoRⅠ G↓AATTC HindⅢ A↓AGCTT CTTAA↑G TTCGA↑A 有一些限制酶的识别序列不是对称的,如 AccBSⅠ[CCGCTC(-3/-3)] 和 BssSⅠ[CTCGTG(-5/-1)]。
为什么原核生物的
限制酶不切割
自己的DNA
答:
当限制酶作用位点上的某一些碱基被甲基化修饰后,限制酶就不能再降解这种DNA了.这样在含有某种
限制酶的
原核生物的细胞中,其DNA分子中不具备这种限制酶的识别
切割序列
,或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上,使
限制酶不能
将其切开.所以限制酶只降解外源入侵的异种DNA,而不分解自身DNA。
为什么直接暴露在末端的
酶切
位点不容易直接
被限制
性核酸内切酶切开?_百...
答:
内切酶在
切割的
时候需要一个结合位点,当
酶切
位点直接暴露在末端的时候就导致内切酶缺少了这个结合位点,致使内切酶
不能
和DNA结合,也就不能行使酶的功能了。因此在PCR设计引物的时候,一般都会在酶切位点前面加上几个保护碱基。
高中生物问题
答:
答案是:D。首先确定目的基因两侧必须用
限制酶
2切,否则
不能
得到目的基因;其次,在质粒上要用限制酶1来切,因为要是用限制酶2
切的
话会将质粒切成两段,而用限制酶1切的话才能形成一个缺口。所以综合起来就是,质粒用限制酶1来切,目的基因两侧用限制酶2来切。
DNA没有
被限制性内切酶
切开或者
切割
不完全怎么办?
答:
(1)检查底物DNA中是否存在可
被限制酶
识别的DNA
序列
。(2)使用随酶提供的反应缓冲液;增大酶量。(3)检查DNA是否已被甲基化以及所用的限制性内切酶是否对甲基化敏感。(4)限制性内切酶经稀释缓冲液稀释后应在当天用完;限制性内切酶通常在最后加入。(5)更换新酶进行实验。(6)酶的体积
不能
超过...
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